SN/T 5173-2021 国境口岸蜱传腹地病毒实时荧光RT-PCR检测方法
简介
SN/T 5173-2021
国境口岸蜱传腹地病毒实时荧光RT-PCR检测方法
Real-time RT-PCRmethod for detecting Heartland Virus in ticks at frontier ports
2021-06-18发布
2022-01-01实施 本文件按照 GB/T 1.1— 2020《标准化工作导则 第 1 部分标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。
1 范围
本文件规定了国境口岸蜱传腹地病毒实时荧光 RT-PCR 检测方法，包括样本前处理、检测程序、方法、结果判定及报告。
本文件适用于检验检疫机构对人及蜱携带腹地病毒的核酸检测。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，1核日期对应的版本适用干本文件∶不注日期的引用文件，其最新版本（句括所有的修改单）租用于本文件。
GB19489 实验室 生物安全通用要求SN/T1293国境口岸蜱类监测规程
WS/T 230 临床诊断中聚合酶链反应（PCR）技术的应用
人间传染的病原微生物名录（中华人民共和国卫生部 卫科教发〔2006】15号）
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1 腹地病毒 Heartland virus，HRTV
单股负链节段性RNA病毒，属于布尼亚病毒科的白蛉病毒属。有S、M和L.片段。其中I.片段编码 RNA依赖性RNA多聚酶，M片段编码糖蛋白Gn和 Gc，S片段编码核衣壳蛋白和非结构蛋白。腹地病毒主要经蜱传播，经蜱叮咬后，人可出现发热及血小板减少等症状。
3.2 逆转录聚合酶链反应 reverse transcription polymerase chain reaction;RT-PCR
将 RNA逆转录（RT）和 cDNA聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。本标准采用一步法逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）。在一步法 RT-PCR中，首先以RNA为模板，利用下游特异性引物，在依赖RNA的DNA聚合酶（逆转录酶）作用下转录合成互补 DNA（cDNA）.该步骤称作"逆转录";随后，再以cDNA为模板，利用上游和下游特异性引物，在DNA聚合酶的作用下进行PCR循环扩增;最终使RNA分子的某个特定区域（目的片段）被扩增达几百万倍。
SN/T 5173-2021
国境口岸蜱传腹地病毒实时荧光RT-PCR检测方法
Real-time RT-PCRmethod for detecting Heartland Virus in ticks at frontier ports
2021-06-18发布
2022-01-01实施 本文件按照 GB/T 1.1— 2020《标准化工作导则 第 1 部分标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。
1 范围
本文件规定了国境口岸蜱传腹地病毒实时荧光 RT-PCR 检测方法，包括样本前处理、检测程序、方法、结果判定及报告。
本文件适用于检验检疫机构对人及蜱携带腹地病毒的核酸检测。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，1核日期对应的版本适用干本文件∶不注日期的引用文件，其最新版本（句括所有的修改单）租用于本文件。
GB19489 实验室 生物安全通用要求SN/T1293国境口岸蜱类监测规程
WS/T 230 临床诊断中聚合酶链反应（PCR）技术的应用
人间传染的病原微生物名录（中华人民共和国卫生部 卫科教发〔2006】15号）
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1 腹地病毒 Heartland virus，HRTV
单股负链节段性RNA病毒，属于布尼亚病毒科的白蛉病毒属。有S、M和L.片段。其中I.片段编码 RNA依赖性RNA多聚酶，M片段编码糖蛋白Gn和 Gc，S片段编码核衣壳蛋白和非结构蛋白。腹地病毒主要经蜱传播，经蜱叮咬后，人可出现发热及血小板减少等症状。
3.2 逆转录聚合酶链反应 reverse transcription polymerase chain reaction;RT-PCR
将 RNA逆转录（RT）和 cDNA聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。本标准采用一步法逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）。在一步法 RT-PCR中，首先以RNA为模板，利用下游特异性引物，在依赖RNA的DNA聚合酶（逆转录酶）作用下转录合成互补 DNA（cDNA）.该步骤称作"逆转录";随后，再以cDNA为模板，利用上游和下游特异性引物，在DNA聚合酶的作用下进行PCR循环扩增;最终使RNA分子的某个特定区域（目的片段）被扩增达几百万倍。
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