DB21/T 2734.2-2017 病菌PCR分型诊断方法第2部分∶产气荚膜梭菌PCR分型检测方法
简介
DB21/T 2734.2-2017
病菌PCR分型诊断方法第2部分∶产气荚膜梭菌PCR分型检测方法
Method ofPCR typing diagnosis for bacterial Part2: Method ofPCR typing detection for Clostridium perfringens
2017- 03-23实施
2017- 02-23 发布 目 次 前言 ................................................................................ 1 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 缩略语 ............................................................................ 1 4 原理 .............................................................................. 1 5 仪器和器材 ........................................................................ 1 6 试剂和引物 ........................................................................ 1 6.1 试剂 .......................................................................... 2 6.2 引物 .......................................................................... 2 7 操作步骤 .......................................................................... 2 7.1 样品的采集、前处理、存放与运输 ................................................ 2 7.1.1 采样注意事项 .............................................................. 2 7.1.2 采样工具 .................................................................. 2 7.1.3 肠内容物的采集与前处理 .................................................... 2 7.1.4 粪便的采集与前处理 ........................................................ 3 7.1.5 产气荚膜梭菌纯培养物 ...................................................... 3 7.1.6 存放与运送 ................................................................ 3 7.2 PCR 检测....................................................................... 3 7.2.1 DNA 提取................................................................... 3 7.2.2 PCR ....................................................................... 3 7.2.2.2 电泳 PCR 反应条件 ...................................................... 4 7.2.2.3 电泳 .................................................................. 4 8 试验成立的条件 .................................................................... 4 9 结果判定 .......................................................................... 4 附录 A（规范性附录） 试剂配制........................................................ 5 A.1 电泳缓冲液（50 倍）............................................................ 5 A.1.1 0.5mol/L 乙二铵四乙酸二钠（EDTA）溶液（Ph 8.0） ......................... 5 A.1.2 TAE(三羟甲基氨基甲烷一乙酸)电泳缓冲液(50 倍) ............................... 5 A.2 1%琼脂糖凝胶 .................................................................. 5 前 言 标准《病菌 PCR 分型诊断方法》按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 标准《病菌 PCR 分型诊断方法》分为两个部分： ——第 1 部分：大肠杆菌 PCR 检测方法； ——第 2 部分：产气荚膜梭菌 PCR 分型检测方法。 本部分为病菌 PCR 分型诊断方法的第 2 部分。 本分由辽宁省动物疫病预防控制中心提出。 本标准由辽宁省畜牧兽医局归口。
DB21/T 2734.2-2017
病菌PCR分型诊断方法第2部分∶产气荚膜梭菌PCR分型检测方法
Method ofPCR typing diagnosis for bacterial Part2: Method ofPCR typing detection for Clostridium perfringens
2017- 03-23实施
2017- 02-23 发布 目 次 前言 ................................................................................ 1 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 缩略语 ............................................................................ 1 4 原理 .............................................................................. 1 5 仪器和器材 ........................................................................ 1 6 试剂和引物 ........................................................................ 1 6.1 试剂 .......................................................................... 2 6.2 引物 .......................................................................... 2 7 操作步骤 .......................................................................... 2 7.1 样品的采集、前处理、存放与运输 ................................................ 2 7.1.1 采样注意事项 .............................................................. 2 7.1.2 采样工具 .................................................................. 2 7.1.3 肠内容物的采集与前处理 .................................................... 2 7.1.4 粪便的采集与前处理 ........................................................ 3 7.1.5 产气荚膜梭菌纯培养物 ...................................................... 3 7.1.6 存放与运送 ................................................................ 3 7.2 PCR 检测....................................................................... 3 7.2.1 DNA 提取................................................................... 3 7.2.2 PCR ....................................................................... 3 7.2.2.2 电泳 PCR 反应条件 ...................................................... 4 7.2.2.3 电泳 .................................................................. 4 8 试验成立的条件 .................................................................... 4 9 结果判定 .......................................................................... 4 附录 A（规范性附录） 试剂配制........................................................ 5 A.1 电泳缓冲液（50 倍）............................................................ 5 A.1.1 0.5mol/L 乙二铵四乙酸二钠（EDTA）溶液（Ph 8.0） ......................... 5 A.1.2 TAE(三羟甲基氨基甲烷一乙酸)电泳缓冲液(50 倍) ............................... 5 A.2 1%琼脂糖凝胶 .................................................................. 5 前 言 标准《病菌 PCR 分型诊断方法》按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 标准《病菌 PCR 分型诊断方法》分为两个部分： ——第 1 部分：大肠杆菌 PCR 检测方法； ——第 2 部分：产气荚膜梭菌 PCR 分型检测方法。 本部分为病菌 PCR 分型诊断方法的第 2 部分。 本分由辽宁省动物疫病预防控制中心提出。 本标准由辽宁省畜牧兽医局归口。
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